生肌玉红复合胶原改善脂肪干细胞功能的实验研究

目的:探索生肌玉红复合胶原改善脂肪干细胞功能及其作用机制.方法:首先,将生肌玉红膏提取液分0.0125 g·L-1、0.025 g·L-1、0.05g·L-1、0.1g·L-1各浓度,以细胞增殖实验筛选生肌玉红膏提取液促进脂肪干细胞增殖的最佳浓度;将筛选的最佳浓度生肌玉红膏提取液、胶原及最佳浓度生肌玉红膏提取液复合胶原,分别以transwell小室实验刺激脂肪干细胞迁移;增殖培养48 h后提取脂肪干细胞蛋白,以免疫蛋白印迹法(Western blot)测定各组细胞外调节蛋白激酶类(extracellular regulated protein kinases,ERK)蛋白表达,同时以酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量.结果:在给药培养后24h、48 h及72 h后,0.05g·L-1生肌玉红膏提取液增殖效果最为明显,均优于各时间观测点其他浓度的生肌玉红膏提取液,培养48 h后,生肌玉红复合胶原组相对于对照组增殖了46％,显著高于生肌玉红膏提取液组27.4％及胶原组27.6％,差异有显著统计学意义(P＜0.05);提高脂肪干细胞迁移率约220％,显著高于生肌玉红膏提取液组140％及胶原组50％;提高脂肪干细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达40％左右,显著高于生肌玉红膏提取液组15％及胶原组10％;同时刺激脂肪干细胞分泌VEGF达411.4 ng·L-1,显著高于生肌玉红膏提取液组207.5 ng·L-1及胶原组240.8 ng·L-1.结论:生肌玉红复合胶原可以通过MARK/ERK通路信号通路显著促进脂肪干细胞功能并刺激血管内皮生长因子分泌,与脂肪干细胞结合可进一步提升促血管新生功效.