新止骨增生丸对膝骨关节炎软骨细胞JAK/STAT信号通路下STAT3、 P-STAT3表达影响及作用机制研究

目的 探讨新止骨增生丸干预膝骨关节炎的机制研究.方法 人软骨细胞株c28/i2稳定传代后并用白介素-1β(IL-1β)干预制备膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型软骨细胞.将细胞分为Con组(正常c28/i2细胞+空白血清)、Mod组(KOA模型c28/i2细胞+空白血清)、XZG组(KOA模型c28/i2细胞+10％新止骨增生丸家兔血清)、Cer组(KOA模型c28/i2细胞+32 nm/L Cerdulatinib)、Cer+XZG组(KOA模型c28/i2细胞+10％新止骨增生丸家兔血清+32 nm/L Cerdulatinib);CCK-8试剂盒检测Mod组细胞和不同浓度新止骨增生丸血清干预的XZG组细胞的增殖活性;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组细胞培养上清液中血小板衍生因子(platelet-derived growth factor,PDGF)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的含量;蛋白质印迹法(Westem-blot)检测各组细胞中信号转导和转录激活子3(STAT3)的磷酸化水平及增殖细胞核抗原(ProliferatingCellNuclearAntigen,PCNA)、STAT3蛋白表达水平;采用SPSS16.0软件对各组数据进行分析,以-x±s表示各组实验结果,多组间比较采用单因素方差分析.结果 与Con组比较,Mod组细胞的酪氨酸蛋白激酶/信号转导子和转录激活子(janus activated kinase signal transducer/activator of transcription,JAK/STAT)信号通路明显活化,STAT3蛋白的磷酸化水平及STAT3蛋白表达显著升高.新止骨增生丸含药血清可明显抑制上述因子的磷酸化发生,与Cer组及Cer+XZG组联合比较分析,新止骨增生丸含药血清可能是通过抑制JAK/STAT信号通路而实现其对膝骨关节炎的治疗作用.结论 新止骨增生丸含药血清通过抑制JAK/STAT信号通路而实现其对膝骨关节炎的治疗作用.