当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞凋亡和脱核因子的影响

目的:通过实验研究当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞细胞凋亡因子BCL-2、Caspase9、Bax,脱核因子C-myc、HDAC2的影响.方法:C57BL/6小鼠20只,雌雄各半,28～32 g.给模型组小鼠每日腹腔注射一次环磷酰胺380 mg·kg-1,正常小鼠腹腔注射等量生理盐水,连续3d.造模后,以脱颈椎法处死各组小鼠,取出股骨,剔除肌肉和结缔组织,剪开股骨两端,用6号针头以生理盐水反复冲洗骨髓腔,并将冲出的骨髓打碎,再用4号针头过滤制成单个细胞悬液,在离心机上2000 r/min,离心10 min,去上清液,加入4 mL冷70％乙醇固定,上振荡器摇匀制成骨髓干细胞样本.细胞实验分为6组,包括正常组、模型组、“EPO”组、“EPO+(G-CSF)”组、当归多糖组、黄芪多糖组、两药配伍组.直接给药当归多糖0.2 mg/mL,黄芪多糖0.2 mg/mL,EPO50 U/mL,G-CSF 50 U/mL于骨髓干细胞体外培养体系中,培养3d,室内18～20℃,20％相对湿度,5％ CO2,37 ℃孵育箱.采用RT-qPCR法检测骨髓干细胞中BCL-2、Caspase9、Bax、C-myc、HDAC2的mRNA表达.结果:(1)造模后模型组小鼠骨髓干细胞BCL-2 mRNA表达下降,Caspase9、Bax mRNA表达升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).①各给药组与模型组BCL-2 mRNA均有明显差异,当归多糖有提升BCL-2 mRNA作用,黄芪多糖作用不明显,两药间有交互作用,合用不如单一用药.②各给药组与模型组Caspase9 mRNA均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有降低Caspase9 mRNA作用,两药交互作用明显,合用不如单用黄芪多糖.③各给药组与模型组BaxmRNA均有明显差异,黄芪多糖有降低BaxmRNA作用,当归糖作用不明显,两药交互作用无统计学意义.(2)造模后模型组小鼠骨髓干细胞C-myc、HDAC2mRNA表达升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).①各给药组与模型组C-myc mRNA均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有降低C-myc mRNA作用,两药交互作用明显,合用不如单一用药;②各给药组与模型组HDAC2 mRNA均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有降HDAC2mRNA作用,两药交互作用明显,合用不如单一用药.结论:当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞能促进BCL-2 mRNA表达、降低Bax、Caspase9 mRNA表达,同时也能降低C-myc、HDAC2mRNA表达,对细胞凋亡因子和细胞脱核因子具有一定的调控作用.并且当归多糖、黄芪多糖两药交互作用明显,合用不如单一用药.