鹿茸多肽对IL-1β诱导退变的椎间盘终板软骨细胞保护作用

目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘终板软骨细胞的影响,分析其对终板软骨细胞保护的作用机制.方法:选取1月龄的健康SD大鼠,并对其椎间盘终板软骨细胞进行分离与培养,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分3组,分别在培养基中加入10 μg/L的IL-1β和10、30、50μg/mL的鹿茸多肽,MTT比色法检测3个时间节点(24、48、72h)各组椎间盘终板软骨细胞的增殖情况;流式细胞仪检测大鼠椎间盘终板软骨细胞的凋亡;qPCR法检测Collagen Ⅱ、CollagenX、caspase-3、MMP-13、Bax、Bcl-2基因的表达水平.结果:在24、48、72 h时间点,MTT法检测10μg/mL鹿茸多肽组在各时间点终板软骨细胞增殖情况与IL-1β诱导组比较,差异不具有统计学意义(P＞0.(05);而30μg/mL组和50μg/mL组均能拮抗IL-1 β对软骨终板细胞增殖的抑制作用,差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);流式分析结果表明,不同浓度的鹿茸多肽均能够降低IL-1 β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例(P＜0.05,P＜0.01);qPCR检测结果表明,IL-1 β诱导组的Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达减弱,CollagenX、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达增强,与空白对照组对比差异具有统计学意义(P＜0.05);各浓度鹿茸多肽组均能够上调Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达(P＜0.05,P＜0.01),下调Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达(P＜0.05,P＜0.01),以50μg/mL组效果最为显著(P＜0.01).结论:一定浓度的鹿茸多肽通过抑制软骨终板细胞的凋亡,促进其增殖,调控其相关基质蛋白及基质降解酶、凋亡因子等基因的表达,起到了对退变的椎间盘终板软骨细胞的保护作用.