麝香乌龙丸对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞微RNAs及相关炎症细胞因子的影响

目的 观察麝香乌龙丸含药血清对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中微RNA(miRNA)-181a、miRNA-16、miRNA-18a表达水平及细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素1β(IL-1β)的影响.方法 将6只SPF级SD大鼠按照随机数字表法分为2组,每组3只.麝香乌龙丸组予麝香乌龙丸水溶剂10 mL/kg(浓度200 mg/mL)灌胃,对照组予等容积0.9％氯化钠注射液灌胃,每日1次.连续灌胃15 d,腹主动脉取血后离心取血清备用;采集30例首次确诊且未经过抗风湿治疗RA患者的新鲜抗凝血液,每个血液标本均分离出PBMCs,将其分为空白对照组、空白血清组、麝香乌龙丸含药血清组,空白对照组每孔仅加入培养基100μL,空白血清组每孔分别加入空白血清10 μL、培养基90 μL,麝香乌龙丸含药血清组每孔分别加入麝香乌龙丸含药血清10 μL、培养基90 μL.相同条件下培养48h后提取总RNA,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组PBMCs中miRNA-181a、miRNA-16及miRNA-18a的表达水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞培养液中TNF-α、IFN-γ及IL-1β的水平.结果 空白血清组与空白对照组细胞培养液中TNF-α、IFN-γ及IL-1β水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);与空白对照组、空白血清组比较,麝香乌龙丸含药血清组细胞培养液中TNF-α、IFN-γ和IL-1β水平均降低(P＜0.05).空白血清组与空白对照组PBMCs中miRNA-181a、miRNA-16及miRNA-18a表达比较差异无统计学意义(P＞0.05);与空白血清组、空白对照组比较,麝香乌龙丸含药血清组miRNA-181a和miRNA-16表达均上调(P＜0.05),miRNA-18a表达下调(P＜0.05).结论 麝香乌龙丸治疗RA的机制与其能上调RA患者PBMCs中miRNA-181a和miRNA-16表达,下调miRNA-18a表达,调控细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-1β的分泌有关.