紫草素对小鼠卵母细胞发育成熟的影响

目的 观察紫草素对小鼠卵母细胞发育成熟的影响,并探讨其作用机制.方法 采用6~8周龄ICR雌性小鼠的GV期未成熟卵母细胞,分别放入含有5、10、20、50 μg/mL浓度紫草素的4组培养液,另外再配置4组含有3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)抑制剂的紫草素培养液,并以不含紫草素的培养液为对照组.单纯含紫草素的各组培养液及对照组直接进行卵母细胞培养,含IBMX抑制剂的紫草素培养液先静置12 h后再洗脱IBMX进行卵母细胞培养.各组均培养2 h后统计生发泡破裂(GVBD)率,12 h后统计第一极体排出率,并显微镜下观察紫草素对卵母细胞纺锤体及第一极体排出的情况.结果 20、50 μg/mL紫草素对卵母细胞的发育成熟具有绝对抑制作用,GVBD率及第一极体排出率均为0;5 μg/mL紫草素对卵母细胞无明显抑制作用(P>0.05);10 μg/mL紫草素对卵母细胞的GVBD率无明显影响(P>0.05),但对第一极体排出率有明显抑制作用(P<0.05);显微镜下观察显示,对照组第一极体排出正常,仅有少量卵母细胞出现异常纺锤体形态,10 μg/mL紫草素组则第一极体排出受到抑制,出现大量卵母细胞异常纺锤体形态,纺锤体呈现无极、散极或者多极等异常现象.结论 高浓度的紫草素对卵母细胞发育成熟具有明显抑制作用,可影响纺锤体的形成和第一极体的排出,其作用机制可能与紫草素抑制卵母细胞能量代谢有关.