汉黄芩苷对糖尿病肾病大鼠肾组织中ANGPTL-4蛋白表达的影响

目的 采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)一次性腹腔注射诱导2型糖尿病肾病大鼠模型,观察汉黄芩苷对肾脏组织中肾小球细胞血管生成素样蛋白4(Angiopoietin like protein-4,ANGPTL-4)表达的影响,为黄芩的开发提供一定的参考.方法 60只清洁级雄性SD大鼠在适应性喂养7天后随机分成糖尿病肾病组(模型组)、空白组(正常组)以及汉黄芩苷治疗组.治疗组和模型组给予STZ 65 mg/kg一次性腹腔注射,空白组则不给予任何干预.造模成功后,正常组和模型组注射1 mL/(kg·d)生理盐水,治疗组给予汉黄芩苷0.2 mg/(kg·d)注射,于治疗4周和8周后处死大鼠各半,观察各组大鼠一般状况、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和空腹血糖(FBG)等的变化,HE染色观察肾脏组织病理学,免疫组化、RT-PCR和Western blotting检测肾脏组织中ANGPTL-4的表达.结果 正常组大鼠一般情况良好,模型组有明显的毛发发黄、粗糙和精神萎靡,同时表现有多饮、多食和多尿症状,汉黄芩苷干预后上述症状有明显好转;与正常组相比,模型组体重和肾脏重量明显降低(P<0.05),SCr、BUN和肾脏占体重百分比明显升高(P<0.05);与模型组相比,汉黄芩苷治疗4周后,SCr、BUN、体重、肾重和肾脏占体重百分比明显降低(P<0.05),治疗8周后进一步降低(P<0.05);HE染色可见,正常组肾小球结构完整,系膜正常,模型组肾小球体积增大,同时伴有系膜区增宽和肾间质炎性细胞浸润,治疗4周后相较于模型组上述情况明显改善,治疗8周后进一步改善;空腹血糖比较,与正常组相比,模型组明显升高(P<0.05),汉黄芩苷治疗4周和8周后虽然有一定的降低(P<0.05),但与正常组差异依然明显;免疫组化、Western blotting以及RT-PCR可见,与正常组相比,模型组ANGPTL-4基因与蛋白表达水平显著上升(P<0.05),汉黄芩苷治疗4周后较模型组明显下降(P<0.05),治疗8周后进一步降低(P<0.05).结论 一次性STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾脏组织中ANGPTL-4呈明显高表达,汉黄芩苷可明显降低其表达,进而改善大鼠肾功能.