艾烟可吸入物对大鼠神经细胞氧化损伤的影响

目的 探讨艾烟可吸入物(PM10)对大鼠神经细胞氧化损伤的影响及PI3K/Akt信号通路在其中的作用.方法 采用24 h内新生SD大鼠乳鼠前额叶皮质及海马组织体外培养原代神经细胞,H2O2诱导建立氧化损伤细胞模型;随机分为空白组、氧化损伤组、氧化损伤+PM10组、氧化损伤+PM10+抑制剂组、PM10组.采用TUNEL和DAPI染色观察神经细胞凋亡形态;MTT法及Western blot分别检测细胞存活率及目的蛋白表达,并用PI3K/Akt通路抑制剂LY294002验证作用通路.结果 MTT检测显示,200μmol/L H2O2能降低神经细胞50％存活率(P<0.001),0.1、0.5 ng/mL艾烟PM10能明显抑制H2O2诱导氧化损伤的神经细胞凋亡(P<0.001);TUNEL和DAPI染色显示,0.5μg/mL艾烟PM10能拮抗H2O2诱导氧化损伤神经细胞凋亡的形态学变化(P<0.001);Western blot检测显示,H2O2及LY294002能降低p-Akt、Bcl-2的表达(P<0.05,P<0.001),上调active-Caspase-3的表达(P<0.01,P<0.001),而艾烟PM10作用相反(P<0.01,P<0.001).结论 艾烟PM10能减少神经细胞氧化应激的凋亡,其机制可能是激活PI3K/Akt信号通路并调控下游凋亡蛋白Bcl-2、active-Caspase-3的表达,拮抗细胞凋亡.