水蛭素通过JAK/STAT3信号通路缓解人肾小管上皮细胞纤维化的相关机制研究

目的:探讨水蛭素抑制人肾小管上皮细胞纤维化的作用机制.方法:将HK-2细胞分为正常对照组、模型组、AG490(3 mg/L)阳性对照组及水蛭素低(1 mg/mL)、中(3 mg/mL)、高(10 mg/mL)浓度组,除正常对照组外其他各组培养基均含5 ng/mL TGF-β1.各组细胞培养24、48、72 h时采用MTF测定细胞增殖情况;各组细胞培养72 h时采用双抗体夹心ELISA法检测细胞分泌Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)和纤连蛋白(Fib)含量;各组细胞培养72 h时采用实时荧光定量PCR法以及Western blot法检测细胞α-SMA、Col Ⅰ、Fib、JAK、STAT3 mRNA和蛋白的表达.结果:水蛭素高、中浓度组细胞在培养24、48、72 h时光密度较模型组显著降低,在培养72 h时细胞培养液中Col Ⅰ、Fib含量较模型组显著降低,细胞中α-SMA、Col Ⅰ、Fib、JAK、STAT3 mRNA和蛋白表达较模型组显著降低(P＜0.05或P＜0.01).水蛭素上述作用均具有浓度依赖性.结论:水蛭素可逆转TGF-ββ1刺激HK-2细胞的增殖和纤维化,其作用机制可能与抑制JAK/STAT3信号通路有关.