土茯苓活性分子落新妇苷联合顺铂对人肺癌A549细胞凋亡的影响

目的:研究土茯苓活性分子落新妇苷联合顺铂对人肺癌A549细胞凋亡的影响.方法:培养人肺癌A549细胞至对数生长期,采用MTT法观察不同浓度落新妇苷作用不同时间对A549细胞活力的影响;将A549细胞分为对照组、顺铂(100 μmol/L)组、顺铂(100 μmol/L)+落新妇苷(300 μmol/L)组及落新妇苷(300 μmol/L)组.药物作用48 h后,倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化,AnnexinV-FITC/PI流式细胞法检测细胞凋亡情况,Westernblot法检测细胞Bax、Bcl-2、eleaved-Caspase-3蛋白的表达情况.结果:落新妇苷能抑制A549细胞活力,其作用随着其浓度和作用时间的增加而增强;倒置显微镜下观察显示,对照组细胞正常生长,各给药组细胞出现体积缩小、变形与凋亡,部分细胞悬浮于培养基中,尤其以顺铂+落新妇苷组明显;AnnexinV-FITC/PI流式细胞凋亡检测结果显示,各给药组A549细胞凋亡率较对照组显著升高(P＜0.01);与顺铂组比较,顺铂+落新妇苷组凋亡率显著升高(P＜0.05);Western blot结果显示,各给药组Bax、cleaved-Caspase-3蛋白表达显著上调,Bcl-2蛋白表达显著下调(P＜0.01),且顺铂+落新妇苷作用更显著(P＜0.01).结论:落新妇苷能增强顺铂对人肺癌A549细胞的促凋亡作用,其机制可能与调控Bax/Bcl-2/Caspase-3凋亡通路有关.