乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白的鉴定及其对胶原诱导性关节炎小鼠的干预研究

目的:分析乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白(Zaocys typeⅡcollagen,ZCⅡ)与其他物种Ⅱ型胶原蛋白(C Ⅱ collagen)的同源性,探讨其对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)小鼠关节炎症的影响.方法:采用限制性胃蛋白酶消化法提取ZC Ⅱ;SDS-PAGE凝胶电泳及紫外分光光度计法对其鉴定,质谱分析其同源性.鸡C Ⅱ小鼠尾根部皮下注射诱导CIA模型;口服ZC Ⅱ高、中、低剂量干预,视觉评分法对关节炎评分,HE染色评价小鼠膝关节病理变化.结果:提取的ZC Ⅱ分子量约为110 ～ 140 kD,紫外吸收峰为230 nm左右;质谱分析所得肽质量指纹图谱与其他物种有4个以上肽段匹配,蛋白评分大于95％.在关节炎症方面,与正常对照组比较,CIA小鼠关节炎及组织病理学评分升高(P＜0.05);与CIA模型组比较,不同剂量ZCⅡ干预组关节炎及组织病理学评分显著降低(P＜0.05).结论:质谱分析结果提示ZCⅡ与其他物种CⅡ具有较高同源性;ZCⅡ能显著抑制CIA小鼠的关节肿胀,改善关节组织病理变化.