基于FGF23-Klotho轴探讨肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠骨骼的保护作用
World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine(2020)
摘要
目的 观察肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠FGF23-Klotho轴的影响,并探讨其对骨骼保护的可能机制.方法 30只db/db小鼠随机分为模型组(20 mL·kg-1)、肾元颗粒组(6.0 g·kg-1)和厄贝沙坦组(30mg·kg-1),10只同窝野生(wild type,WT)小鼠作为空白组(20 mL·kg-1),各组小鼠给药容量均为(20 mL·kg-1).连续灌胃12周后,采用生化检测仪检测血钙、血磷含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组血清成纤维化生长因子23 (Fibroblast growth factor 23,FGF23)含量,以及骨骼钙盐含量、骨骼碱性磷酸酶(ALP)活性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测骨骼骨保护素(osteoprotegerin,OPG)蛋白表达水平;免疫荧光双标检测肾脏Klotho和成纤维化生长因子受体1(Fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)蛋白,并于激光共聚焦下观察拍照.结果 与正常组比,模型组小鼠血钙减少,血磷含量升高(P<0.05),小鼠血FGF23含量显著升高(P<0.05),小鼠骨骼中钙盐含量减少,ALP活性降低(P<0.05),小鼠骨骼OPG蛋白表达减少(P<0.05),小鼠肾脏Klotho和FGFR1免疫荧光双标阳性细胞数显著减少(P<0.05);与模型组比,肾元颗粒组小鼠血钙升高,血磷减低(P<0.05),血FGF23含量降低(P<0.05),骨骼钙盐含量升高,骨骼ALP活性升高(P<0.05),骨骼OPG蛋白表达量增加(P<0.05),肾脏免疫荧光双标阳性细胞数增多(P<0.05).结论 肾元颗粒能改善db/db糖尿病肾病小鼠骨质的流失,而其作用机制可能与FGF23-Klotho轴平衡恢复有关.
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