慢阻肺气虚证大鼠模型的建立及评价

目的 为进一步研究慢阻肺相关机制及中医证候,建立病证结合的慢阻肺气虚证大鼠模型,探究慢阻肺气虚证大鼠模型评价指标.方法 采用肺部滴入LPS合并烟熏和单纯肺部滴入LPS两种方法建立的慢性阻塞性肺疾病大鼠模型为研究对象,采用病理、肺功能等进行慢阻肺判定;通过宏观表征采集、体重观察、抓力测试、旷场实验、ATP含量和线粒体动力学蛋白印迹检测进行大鼠证候判定.结果 从第3周开始,LPS联合烟熏组体重显著小于空白组和LPS组(P<0.05),持续至第12周;第8周时,LPS联合烟熏组抓力最大值显著小于空白组及LPS组(P<0.05),三组之间抓力平均值无统计学差异;LPS联合烟熏组旷场总距离和平均速率均显著小于空白组和LPS组(P<0.05);第12周结束时,LPS联合烟熏组抓力最大值和平均值均显著小于空白组和LPS组(P<0.05);LPS联合烟熏组旷场总距离和平均速率均显著小于空白组和LPS组(P<0.05);第12周结束时,ATP含量检测结果显示,LPS联合烟熏组肺组织和骨骼肌中ATP含量较空白组有明显的下降(P<0.05);LPS联合烟熏组骨骼肌ATP含量较空白组和LPS组均有明显的下降(P<0.05);Western Blot结果显示,与空白组和LPS组相比,LPS联合烟熏组大鼠肺和骨骼肌组织均表现出Drp1蛋白表达量升高(P<0.05)、Mfn1蛋白表达量降低(P<0.05);肺功能结果显示LPS联合烟熏组肺顺应性低于空白组和LPS组,而肺呼吸阻力高于空白组和LPS组;病理结果显示,LPS联合烟熏组和LPS组均表现出慢阻肺特征性病理变化,LPS联合烟熏组比LPS组病理改变更加显著.结论 LPS滴入结合烟熏的方法可以成功的建立慢阻肺大鼠气虚证模型,这种模型较为符合临床上慢阻肺患者气虚证阶段的症状表现,且慢阻肺气虚证大鼠模型出现的各种证候表现与线粒体融合/分裂蛋白之间的平衡及能量代谢有着非常密切的关系,Drp1、Mfn1蛋白表达和ATP含量变化可以作为慢阻肺气虚证大鼠模型的评价指标.