β-蜕皮甾酮抑制IL-1β诱导的关节软骨细胞退变的实验研究

目的:探讨β-蜕皮甾酮(β-Ecd)抑制IL-1β 诱导关节软骨细胞退变的作用及机制.方法:进行关节软骨细胞的分离、培养和制备空白血清、β-Ecd含药血清.取对数生长期第三代软骨细胞按1×105接种于两块96孔酶标板中,分为4组,A组:正常软骨细胞+20％空白血清;B组:正常软骨细胞+20％β-Ecd含药血清;C组:IL-1β诱导软骨细胞+20％空白血清;D组:IL-1β诱导软骨细胞+20％β-Ecd含药血清.4组同一时间培养,并相同时间对C组和D组的正常软骨细胞加入10μg/L的IL-1β进行诱导退变,诱导时间为48 h.RT-PCR计数检测各组关节软骨细胞中胶原(I、II、X型)和软骨细胞外基质中金属蛋白酶(MMP-13、MMP-9)的表达.结果:关节软骨细胞中胶原表达结果显示:与A组比较,C组I型胶原mRNA表达升高(P<0.05),B组差异无显著性(P>0.05);与C组比较,D组差异无显著性(P>0.05).与A组比较,B组和C组Ⅱ型胶原mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与C组比较,D组Ⅱ型胶原mRNA表达均明显升高(P<0.01).与A组比较,C组X型胶原mRNA表达明显升高(P<0.05),B组差异无显著性(P>0.05);与C组比较,D组差异无显著性(P>0.05).关节软骨细胞外基质中金属蛋白酶表达结果显示:与A组比较,C组MMP-9、MMP-13 mRNA表达均明显升高(P<0.01),B组差异无显著性(P>0.05);而与C组比较,D组MMP-9、MMP-13 mRNA表达均明显降低(P<0.01).结论:β-Ecd可能通过影响膝关节软骨细胞胶原和金属蛋白酶的表达而延缓关节软骨细胞的退变.