猫爪草总皂苷对A549细胞增殖的抑制及诱导凋亡作用的研究

目的:观察猫爪草总皂苷(RRTS)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用.方法:采用系统溶剂法提取RRTS,RRTS(400、200、100、50、25、12.5 mg/L)作用于A549细胞,实时细胞分析系统(RTCA)和CCK-8法观察RRTS对细胞增殖的抑制作用,及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂、表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)抑制剂对上述作用的影响;JC-1染色法观察线粒体膜电位的改变;qRT-PCR法检测凋亡相关Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的mRNA表达情况;比色法检测Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达.结果:400～50 mg/LRRTS能明显降低细胞存活率;400～25 mg/L浓度能明显降低细胞指数(CI)值,50μmol/LCaspase-3抑制剂能阻断这一作用;200～50 mg/LRRTS能降低线粒体膜电位;100 mg/LR-RTS能显著升高Bax、Caspase-3、Caspase-9的mRNA表达量,使Bcl-2 mRNA表达略有降低;200～50 mg/L RRTS能显著升高Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达.结论:RRTS能抑制A549细胞增殖并诱导其凋亡,可能通过上调Bax表达,激活Caspase-9、Caspase-3级联反应,从而激活线粒体通路诱导A549细胞凋亡.