依赖热稳定解旋酶DNA恒温扩增技术检测烟曲霉

Shenzhen Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine(2018)

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Abstract
目的:探讨分析依赖热稳定解旋酶DNA恒温扩增技术检测烟曲霉;方法:将烟曲霉基因作为目的片段,以此设计特异度引物,并且在恒温条件下建立快速检测烟曲霉依赖热稳定解旋酶DNA恒温扩增技术,进行特异度和灵敏度实验,并与普通聚合酶链式反应(PCR)方法进行比较.结果:热稳定的依赖解旋酶恒温核酸扩增(tHDA)产物序列与EnsemblFungi数据库的序列相似率高达95%;在特异度检测中,黄曲霉的电泳结果为阳性,在100 bp处能够观察到清晰的条带;在灵敏度检测中,不同稀释浓度均能够明显观察到条带;结论:烟曲霉的tHDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求低,普通水浴槽即可进行反应.
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