基于DNA条形码的藏药洪连鉴定研究

目的:对藏区常使用的洪连药材进行DNA条形码鉴定,为准确鉴定藏区洪连药材提供方法.方法:从5个藏区收集12批洪连药材,提取其DNA,采用ITS以及psbA-trnH序列进行聚合酶链式反应(PCR)引物扩增并测序,所得序列从GenBank数据库进行相似性同源查询,采用DNAMAN、Editseq、Mega等软件,寻找其特异位点,计算样品Kimura2-parameter (K2-P)遗传距离,并构建N-J系统构建树.结果:12批样品来源于3个种,ITS序列长度为552 bp,变异位点为34个,在107 bp处能将3种兔耳草区分;psbA-tmH序列长度约为250 bp,存在12个变异位点,在136 bp处能将3种兔耳草区分.根据遗传距离构建N-J树,3种兔耳草明显分为3支.结论:ITS序列以及psbA-trnH序列可以作为兔耳草属鉴别的1种方法,为藏药的准确鉴别提供了方法.