西洛他唑促进小鼠急性脑梗死区域血管内皮增殖相关研究
Zhejiang Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine(2020)
摘要
目的 观察西洛他唑(CLZ)促进小鼠脑梗死急性期新生血管增殖效果并探讨其作用机制.方法 12只8周龄雄性Icr小鼠建立左侧大脑中动脉永久闭塞模型,分为CLZ组和羟乙基-β-环糊精(HPβCD)组,分别给予CLZ悬浊液及HPβCD溶液进行每日腹腔内注射治疗,7天时处死小鼠使用福尔马林溶液进行灌流固定后,将小鼠大脑取出进行冰冻切片并进行血小板-内皮细胞粘附分子(CD31)和4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)免疫荧光染色,通过使用imagaJ软件测定小鼠大脑半暗带区域内CD31标记区域所占面积,评估CLZ是否具有促进小鼠脑梗死半暗带区域血管内皮增殖以及是否具有促进半暗带区域血管新生能力.另将小鼠大脑由来血管内皮细胞用血管内皮培养液进行培养,1天后分别加入含等量西洛他唑悬浊液(10μg/L)和HPβCD溶液的血管内皮培养液继续进行培养,培养开始第4天时,各组培养皿中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),于培养开始后第5天时固定细胞并进行相关染色,观察BrdU阳性标记细胞数、DAPI细胞数以及两者比例,评估西洛他唑是否具备促进血管内皮增殖效能.结果 CLZ组小鼠注射药物后半暗带区域CD31阳性标记细胞所占区域面积(0.101±0.027)较HPβCD组(0.049±0.013)有明显增高.加入CLZ组培养的小鼠大脑由来血管内皮细胞中,CLZ组的BrdU阳性标记细胞所占比例(0.72±0.03)较HPβCD组(0.39±0.05)有明显增加.以上差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CLZ可通过促进小鼠血管内皮增生,从而增加小鼠脑梗死后半暗带新生微小直径血管数目,从而达到改善半暗带区域脑血流量效果.
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