化纤煎冻干粉溶液对TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞增殖和分化的影响

目的:观察化纤煎冻干粉溶液对人胚肺成纤维细胞增殖、活化、分泌细胞外基质的影响,并观察其对TNF-α细胞因子和NF-κB信号通路的调控,探讨化纤煎治疗特发性肺纤维化(IPF)的作用机制.方法:采用TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖、活化,化纤煎冻干粉溶液进行干预,CCK8法检测化纤煎冻干粉溶液对MRC-5细胞增殖的影响.qRT-PCR法检测α-SMA mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA,观察成纤维细胞向肌成纤维细胞转化、分泌细胞外基质情况.qRT-PCR法检测TNF-α mRNA、NF-κB p65 mRNA、IκBα mRNA、IKKβ mRNA,Western Blot检测NF-κB p65蛋白,观察化纤煎对炎症反应因子TNF-α与炎症信号通路NF-κB的作用.结果:与空白对照组比较,模型对照组的细胞增殖水平显著增加(P＜0.01),与模型对照组比较,化纤煎中、高剂量组MRC-5细胞增殖水平均明显下降(P＜0.01).模型对照组α-SMA mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA、TNF-α mRNA和NF-κB p65 mRNA表达水平显著高于空白对照组(P＜0.05或P＜0.01),IκBα mRNA、IKKβ mRNA表达水平显著低于空白对照组(P＜0.01).与模型对照组比较,化纤煎低、中、高剂量组α-SMA mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA、TNF-α mRNA和NF-κB p65 mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),IκBα mRNA、IKKβ mRNA表达水平均上升(P＜0.05或P＜0.01).模型对照组NF-κB p65蛋白表达水平显著高于空白对照组(P＜0.01),与模型对照组比较,化纤煎低、中、高剂量组NF-κB p65蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:化纤煎冻干粉溶液可能通过抑制炎症因子TNF-α分泌和NF-κB炎症信号通路活化,从而发挥抗纤维化作用.