参芪扶正注射液对肺癌细胞凋亡及NCR1/NKp46通路的影响

目的:探讨参芪扶正注射液对肺癌细胞凋亡及负性调节区域因子1/自然杀伤因子蛋白46 (NCR1/NKp46)通路的影响.方法:将人肺癌LEWIS细胞分为LEWIS组、顺铂组、参芪扶正注射液低、高剂量组(低、高剂量组),以上各组每孔设6个平行样.LEWIS组取10 mL肺癌LEWIS细胞液(细胞浓度为5×106/mL)于10％胎牛血清的DMEM培养液中;顺铂组细胞培养方法同LEWIS组,加入顺铂使终浓度为50.0 μg/mL;低、高剂量组细胞培养方法同LEWIS组,分别加入参芪扶正注射液,使终浓度为50.0μg/mL、100.0 μg/mL,培养72 h.培养结束后,MTT法测定各组细胞活力,结晶紫染色测定单克隆形成数目,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡水平,RT-PCR法及Western blot法测定NCR1、NKp46基因与蛋白表达水平.结果:与LEWIS组比较,顺铂组与低、高剂量组细胞OD值、存活率、克隆形成数目降低,凋亡率、G1期水平及NCR1、NKp46mRNA和蛋白表达升高(P＜0.05).与顺铂组比较,低剂量组细胞OD值、存活率、克隆形成数目升高,凋亡率、G1期水平及NCR1、NKp46 mRNA和蛋白表达降低(P＜0.05);高剂量组细胞OD值、存活率、克隆形成数目降低,凋亡率、G1期水平及NCR1、NKp46 mRNA和蛋白表达升高(P＜0.05).与低剂量组比较,高剂量组OD值、存活率、细胞克隆形成数目降低(P＜0.05),凋亡率、G1期水平及细胞NCR1、NKp46 mRNA和蛋白表达均升高(P＜0.05).结论:参芪扶正注射液能抑制人肺癌LEWIS细胞增殖,促进其凋亡;其机制与参芪扶正注射液可促进肺癌LEWIS细胞NCR1、NKp46 mRNA与蛋白高表达,进而介导NK细胞杀伤肺癌细胞有关.