灸法热刺激对脐静脉血管内皮细胞Caspase-3表达影响的研究

目的 研究灸法热刺激对人脐静脉血管内皮细胞中(HUVECs) Caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨灸法中温热刺激的抗凋亡及促凋亡的效应机制.方法 原代HUVECs分为正常组(37℃)、适宜温热刺激组(40℃)和凋亡组(43℃),正常组不做任何处理,适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,凋亡组置于43℃培养箱中刺激30min,每天2次,各组于第1天、2天、3天刺激结束4h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天用QPCR和Western blot技术检测Caspase-3基因和蛋白表达.结果 三组HUVECS生长活力逐渐增强,与第1天和第2天比差异均有统计学意义(P＜0.001);每天适宜温热刺激组细胞生长活力较正常组增强,差异均有统计学意义(P＜0.001或P＜0.05);每天凋亡组细胞生长活力较正常组减弱,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.001).第3天,与正常组比,适宜温热刺激组HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均降低(P＜0.001),凋亡组HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P＜0.05),凋亡组与适宜温热刺激组比,HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P ＜0.001).结论 灸法热刺激可调控HUVECs内的Caspase-3表达来调控细胞凋亡的过程,为全面认识灸法“活血化瘀”的生物学机制提供新的实验依据.