表面等离子共振技术研究牛磺熊去氧胆酸钠与牛血清白蛋白的相互作用

目的 通过ProteOn XPR36检测牛磺熊去氧胆酸钠(TUDCA-Na)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用. 方法 把BSA通过氨基偶联在GLH芯片表面,优化TUDCA-Na与BSA的相互作用条件,获取二者相互作用的结合常数(ka)、解离常数(kd),并通过计算kd/ka的比值,得出二者的平衡常数(KD). 结果 通过优化后,用pH为4的10 mM醋酸钠配制300 nM BSA蛋白,偶联时间为5min,最终BSA蛋白的偶联量达11 000 RU左右.TUDCA-Na溶液以100、50、25、12.5、6.25、0M的梯度浓度和BSA发生相互作用,互作的流速为30 μL/min,结合和解离时间分别为80 s和60 s,最终选用Langmuir模型进行拟合,ka为2.35×104 1/Ms;kd为1.29 1/s. 结论 TUDCA-Na与BSA蛋白间存在相互作用,二者的平衡常数为5.47×10-5M.