湖南省不同种类蛇源裂头蚴线粒体pnad1基因序列多态性研究

目的 对湖南省不同种类蛇源裂头蚴进行形态学与分子生物学鉴定,并分析其线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第1亚基基因部分序列(pnad1)多态性. 方法 对从湖南永州、郴州、岳阳等地区6种常见的野生蛇体内获得的11条裂头蚴(来自大王蛇3条、乌梢蛇2条、眼镜蛇1条、灰鼠蛇2条、滑鼠蛇2条和银环蛇1条)进行形态学鉴定,PCR扩增其线粒体pnad1,并测序,分析其核苷酸序列种内差异,并与已报道的迭宫属绦虫和其他属绦虫的相应序列进行同源性比较;以土耳其斯坦东毕吸虫为外群,用软件MEGA7.0采用邻接法构建系统进化树. 结果 从不同蛇类分离的11条虫体经形态学鉴定为裂头蚴.PCR扩增出11条裂头蚴分离株的nad1序列,片段大小为648 bp,种内遗传差异分别为0～ 1.4％.与GenBank中收录的欧猬迭宫绦虫分离株序列相似性为97.8％～99.3％,与其它绦虫的序列相似性均低于74.3％.系统进化树结果显示,本研究分离的不同蛇源裂头蚴分离株与已知欧猬迭宫绦虫聚为一支,与微小膜壳绦虫和阔节裂头绦虫亲缘关系较近,与其它绦虫分支相隔较远. 结论 湖南省不同蛇源裂头蚴分离株均为欧猬迭宫绦虫,但存在一定的遗传变异,且线粒体pnad1基因适合作为分子标记对蛇源裂头蚴进行遗传变异研究.