miR-138靶向OX40L对实验性自身免疫性脑脊髓炎幼鼠的作用机制研究

目的:探究miR-138/OX40L分子轴对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)鼠的影响.方法:建立EAE小鼠模型并设为EAE组,未作处理的小鼠为对照组;流式细胞术分选小胶质细胞并检测T细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测活化小胶质细胞内TLR3、TLR4和FIZZ-1表达;RT-qPCR检测miR-138和OX40L mRNA表达水平;Western blot检测OX40L蛋白水平;MTT法检测T细胞增殖能力;双荧光素酶报告基因实验用于验证miR-138和OX40L的靶向关系.结果:与对照组相比,EAE组小鼠出现四肢瘫痪、大小便失禁、体重减轻等症状,同时神经功能评分降低.EAE组小鼠活化小胶质细胞比例显著高于对照组小鼠,且TLR3、TLR4和FIZZ-1表达水平增加.miR-138在EAE小鼠脑组织和分离的小胶质细胞中表达下调(P<0.05),在小胶质细胞中过表达miR-138导致与其共培养的T细胞增殖能力下降(P<0.05),凋亡率增加(P<0.01).miR-138能靶向结合OX40L mRNA从而调节OX40L蛋白表达.在小胶质细胞中过表达OX40L能促进T细胞的活性(P<0.05)并降低其凋亡(P<0.001);但同时过表达miR-138和OX40L部分消除了OX40L对T细胞活性的促进作用.结论:EAE小鼠的小胶质细胞中miR-138通过调节OX40L的表达影响T细胞活性,可能对EAE的治疗产生一定的效果.