R848联合PGE2促成熟树突状细胞产生高水平IL-12

目的:比较R848联合PGE2促成熟树突状细胞(DCs)和IL-1β、IL-6、TNF-α联合PGE2促成熟DCs的差异.方法:从外周血单个核细胞分选出CD14+单核细胞后,采用贴壁法在无血清培养基AIM-V中培养.用rhGM-CSF和rhIL-4诱导5 d获得未成熟DCs后,分别用R848联合PGE2或IL-1β、IL-6、TNF-α联合PGE2促成熟2 d.采用流式细胞术检测DCs表型、吞噬能力和存活率,通过混合淋巴细胞反应检测DCs刺激异体T细胞增殖的能力,ELISA检测成熟DCs分泌细胞因子的能力以及细胞内因子染色检测诱导Th1/Th2细胞反应的能力.结果:两种方案促成熟DCs表达CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR和CXCR4的水平均相似,其中CD40、CD80、CD83、CD86和HLA-DR阳性DCs的频率均超过90％,而R848联合PGE2促成熟DCs表达CCR7的水平高于IL-1β、IL-6、TNF-α联合PGE2促成熟DCs.此外,两种方案促成熟DCs的存活率、吞噬能力、刺激异体T细胞增殖的能力也相似.尽管两种方案促成熟DCs均产生较低水平IL-10,但R848联合PGE2促成熟DCs分泌细胞因子IL-12p40和IL-12p70的量均明显高于IL-1β、IL-6、TNF-α联合PGE2促成熟DCs.此外,R848联合PGE2促成熟DCs诱导表达IFN-γ的CD3+CD8-T(Th1)细胞的频率高于IL-1β、IL-6、TNF-α联合PGE2促成熟DCs.结论:两种方案促成熟DCs主要表型和功能相似,但R848联合PGE2促成熟DCs产生IL-12p40和IL-12p70的水平更高,提示R848联合PGE2促成熟DCs可能有助于进一步提高基于DCs的免疫疗法的疗效.