miR-199-3p介导mTOR对骨肉瘤细胞自噬的影响

目的:探究miR-199-3p 介导雷帕霉素靶向基因(mTOR)对骨肉瘤(OS)细胞自噬的影响.方法:收集15 例 OS 患者癌组织与癌旁组织,另购买人OS 细胞U-2 OS 与人成骨细胞hFOB,将过表达miR-199-3p 序列与无关序列转染至U-2OS 细胞中,分为空白组?无关序列组(NC 组)?过表达组(miR-199-3p-mimic 组),采用RT-qPCR 检测患者组织与转染和未转染组细胞中miR-199-3p 与mTOR 的相对表达,CCK-8 检测转染后各组细胞增殖情况,Western blot(WB)检测细胞中mTOR?Bax?Bcl-2?LC3-Ⅱ/ Ⅰ蛋白表达情况,Annexin V-FITC 检测转染后细胞凋亡情况,双荧光酶素报告鉴定miR-199-3p 与mTOR 之间的关系.结果:OS 患者癌组织与U-2 OS 细胞中miR-199a-3p 表达明显上升?mTOR 表达明显降低,而癌旁组织与hFOB 细胞中表达与其相反(P<0. 05),细胞转染后miR-199-3p-mimic 组miR-199a-3p 表达明显上升,而mTOR 表达明显降低,细胞增殖降低,凋亡增加,与空白组和NC 组相比存在差异(P<0. 05),细胞转染后miR-199-3p-mimic 组中Bax?LC3-Ⅱ蛋白与LC3-Ⅱ/ Ⅰ比值明显上升,mTOR?Bcl-2?LC3-Ⅰ蛋白表达明显降低,与空白组与NC 组相比存在差异(P<0. 05),双荧光酶素报告显示mTOR 是miR-199a-3p 的靶标基因.结论:过表达miR-199a-3p 可抑制mTOR 的表达引起细胞自噬从而促进细胞凋亡降低细胞增殖.