乌头碱对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及自噬的影响

目的:观察乌头碱对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡及自噬的影响,探讨其在抗类风湿关节炎疾病中的作用机制.方法:对类风湿关节炎(RA)患者的膝关节滑膜组织进行原代细胞培养RA-FLS,采用不同浓度的乌头碱对RA-FLS进行处理,运用相差显微镜观察RA-FLS的形态结构,运用MTT法测定RA-FLS的增殖活性,流式细胞仪测定RA-FLS的细胞凋亡率,采用定量RT-qPCR、Western blot、免疫荧光法测定LC3基因和蛋白的表达.结果:乌头碱能有效抑制RA-FLS细胞增殖,倒置显微镜下发现经乌头碱处理后RA-FLS细胞逐渐变圆、间隙增加;流式检测乌头碱能促进RA-FLS凋亡;定量RT-qPCR、Western blot及免疫荧光检测LC3基因及蛋白的水平均随乌头碱浓度的增加而增加,LC3表达水平明显增强.结论:乌头碱可抑制RA-FLS增殖并诱导凋亡,且具有浓度依赖性,这可能与其过度激活RA-FLS中的自噬水平有关.