抗IL－13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定

目的：筛选特异性好、有体外中和特性的抗IL－13单链抗体，并进行可溶性表达和鉴定。方法：前期课题组构建了大库容量天然单链抗体文库，本研究采用噬菌体展示技术对天然抗体文库进行3轮富集，然后从3轮富集后的文库中采用ELISA进行筛选抗IL－13阳性单链抗体；将特异性好、亲和力相对较高的阳性单链抗体转入表达载体中进行表达并鉴定。结果：经3轮噬菌体展示富集，有30％左右的克隆子为阳性；经过约500株克隆子筛选，筛选到2株特异性和亲和力相对较高，有体外中和特性的单链抗体；将筛选的单链抗体基因转入表达载体LZ16中进行了表达，并采用生物大分子相互作用技术、Western blot等进行了鉴定。结论：成功筛选到特异性好、亲和力相对较高并具有体外中和活性的抗IL－13单链抗体。