人GITRL和IL-21基因对CML来源树突状细胞功能的影响

目的:本研究构建人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(GITRL)联合白细胞介素21(IL-21)基因真核表达载体,为探讨目的基因对慢性粒细胞白血病(CML)来源树突状细胞(DC)的影响.方法:脂质体介导法将重组真核表达载体转染经纯化的伊马替尼治疗有效、无效的慢性期CML患者及健康志愿者来源的DC,流式细胞仪检测转染后DC的CD1a、CD83、CD86表达率变化.将转染后的DC与纯化的自体NK混合培养使之成为DC-CIK.以DC-CIK细胞为效应细胞,乳酸脱氢酶释放法观察其对靶细胞的杀伤率.结果:所获目的基因经测序与GenBank比对序列一致,真核表达载体质粒经限制性酶切鉴定片段大小正确,并均可转染至伊马替尼治疗有效、无效的慢性期CML患者及健康志愿者来源的DC细胞.经转染DC的CD1a、CD83、CD86表达率增加,细胞毒活性试验表明转染后的DC可增加自体NK细胞对K562细胞的杀伤活性.结论:各组DC能够通过转染IL-21和GITRL基因的方式获得自我活化、上调自身细胞表面分子的表达,增强其对肿瘤细胞的细胞毒活性.