利用目的基因随机表位库筛选葡激酶抗原决定簇

目的 :用目的基因随机表位库方法寻找葡激酶 （straphylokinaseSAK）的显性表位。方法 :①SAK免疫BALB C小鼠 ,免疫亲和层析纯化抗血清后 ,抗SAK抗体用生物素标记 ;②构建SAK随机表位肽库 ,随机挑取 12个独立克隆测序 ,分析库DNA片段的分布和碱基含量情况 ;③以多抗为靶蛋白用克隆原位杂交法筛选肽库 ;④构建SAK的缺失突变体mSAK ,Westernblot分析mSAK的免疫反应性。结果 :①筛选肽库得到一个由 19个氨基酸组成的免疫显性表位区 ,命名为A1区 ;②mSAK不能与抗SAK多抗反应。结论 :用简便、有效的方法筛选得到了SAK的一个表位A1区 ,初步确定A1区是SAK引起免疫反应的重要区域。