乙肝病毒X蛋白通过上调NOX4的表达活化肝星状细胞

目的:探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对肝星状细胞(HSC)活化的影响及其可能的分子机制.方法:构建稳定转染HBx基因的L02肝细胞(L02-HBx),Western Blot鉴定细胞株中HBx蛋白的稳定表达.以L02-HBx、转染空质粒(L02-pcDNA3.1)和未转染肝细胞(L02)的条件培养基,分别孵育肝星状细胞株LX-2,即LX-2/L02-HBx、LX-2/L02-pcDNA3.1、LX-2/L02,Western Blot检测上述各组细胞α-SMA(肝星状细胞活化标志)和NOX4的蛋白表达.以L02-HBx的条件培养基孵育LX-2细胞,分为转染si-NOX4(LX-2/L02-HBx+ si-NOX4)、无关干扰片段(LX-2/L02-HBx+snc-RNA)、未转染(LX-2/L02-HBx)3组,Western Blot检测各组LX-2细胞的α-SMA蛋白表达.结果:L02-HBx中稳定表达HBx蛋白;LX-2/L02-HBx细胞中α-SMA和NOX4的蛋白表达显著高于LX-2/L02-pcDNA3.1、LX-2/L02细胞(P＜0.01);LX-2/L02-HBx细胞敲减NOX4后(LX-2/L02-HBx+si-NOX4),α-SMA的蛋白表达显著低于LX-2/L02-HBx+snc-RNA和LX-2/L02-HBx细胞口＜0.05).结论:肝细胞中表达的HBx蛋白可以通过HSC中NOX4上调α-SMA的表达,促进HSC的活化.