孤儿核受体Nur77对缺/复氧损伤中心肌细胞自噬的调节

目的:研究孤儿核受体Nur77对缺/复氧损伤中心肌细胞自噬的调节作用.方法:差速贴壁法分离乳鼠心肌细胞,经免疫荧光染色鉴定纯度.缺氧(1％O2、5 ％CO2和94％N2)培养12 h后,常氧培养2 h构建心肌细胞缺/复氧损伤.实时定量PCR和western blot的方法检测Nur77的表达变化.通过siRNA转染抑制心肌细胞nur77表达,通过自噬标志蛋白表达改变作为细胞自噬水平的变化.结果:原代分离的心肌细胞纯度95％以上.缺氧12h和缺/复氧(12 h/2h)刺激后,心肌细胞中Nur77表达都明显升高(P＜0.0l).与缺氧组相比,缺/复氧组细胞质中的水平明显增加(P＜0.01),细胞核中Nur77水平无明显变化.抑制Nur77后,缺/复氧组自噬水平明显降低,缺氧组心肌细胞自噬水平无明显变化.结论:Nur77参与缺/复氧损伤中心肌细胞自噬水平的调节.