干扰LRP16基因表达对人卵巢癌耐药SKOV3/DDP细胞耐药性的影响及机制研究

目的:探究干扰人白血病相关蛋白 16(LRP16)基因表达对人卵巢癌耐药 SKOV3/DDP 细胞耐药性的影响及其相关机制.方法:采用 Real-time PCR 和蛋白免疫印迹(WB)检测 LRP16 在敏感组(SKOV3 细胞)、 耐药组(SKOV3/DDP 细胞)、 LRP16 干扰组(SKOV3/DDP 细胞 - 稳定转染 LRP16 shRNA 质粒)和 NC 组(即阴性对照组,SKOV3/DDP 细胞 - 稳定转染阴性对照质粒)细胞中的表达情况;MTT 试验检测 LRP16 对 SKOV3/DDP 细胞耐药性的影响;彗星试验检测 LRP16 对顺铂(DDP)诱导 DNA 损伤的影响;流式细胞术(FCM)试验检测细胞凋亡变化;WB 试验检测 PTEN、 p-Akt 和 NF-κB 蛋白表达水平.结果:LRP16 干扰组细胞的耐药指数(RI)值(3.19±0.21)显著低于耐药组细胞(6.84±0.37)(P＜0.05).DDP(25 μmol/L)处理 24 h 后,LRP16 干扰组 DNA 损伤的细胞百分比、 细胞凋亡百分比均显著低于耐药组和 NC 组(P 均 ＜0.05),而耐药组和 NC 组比较差异无统计学意义(P＞0.05);LRP16 干扰组细胞 PTEN 蛋白相对表达量高于耐药组和 NC 组(P 均 ＜0.05),而 p-Akt 和 NF-κB 相对表达量低于耐药组和 NC 组(P 均 ＜0.05).结论:干扰 LRP16 基因表达可逆转卵巢癌耐药 SKOV3/DDP 细胞的耐药性,PTEN/Akt/NF-κB 可能是其中的关键信号通路.