HIV-1 Tat蛋白通过增加线粒体ROS产生诱导人外周血B淋巴细胞凋亡

目的:探讨HIV-1 Tat蛋白对人外周血B淋巴细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法:采用流式细胞分选术分离HIV阳性患者外周血单核细胞的B淋巴细胞, 分别转染pTat或pcDNA3.1各10μg (分别为pTat组与pcDNA3.1组), 采用MTT实验检测细胞胞增殖情况, 流式细胞术检测凋亡情况, DCHF-DA测定ROS水平, 彗星试验检测细胞DNA损伤情况.结果:pTat组转染24h、48h的细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及线粒体ROS水平均显著高于pcDNA3.1组 (P＜0.05).pcDNA3.1组细胞的DNA大部分呈圆形荧光团, 无拖尾现象;pTat组的细胞DNA拖尾现象, 呈现典型彗星图像.与pcDNA3.1组相比, pTat组细胞DNA尾长、尾部DNA比例均显著增加 (P ＜0.05).结论:HIV-1 Tat蛋白可能通过增加线粒体ROS产生, 诱导DNA损伤, 进而抑制人外周血B淋巴细胞增殖并促进其凋亡.