机械牵拉诱导人RPE细胞IL-8分泌及其对PI3K/AKT通路的影响

目的:视网膜脱离发生机制尚不明确,本文旨在研究机械应力牵拉后视网膜色素上皮细胞上清中IL-8分泌量的变化以及人其对RPE细胞PI3K/AKT通路变化影响.方法:培养人RPE细胞,应用Flex-cell细胞应力加载系统牵拉人RPE细胞不同时间(0h、1h、3h、6h、9h)建立不同牵拉时间的模型.分别标记为对照组、牵拉1h组、牵拉3h组、牵拉6h组、牵拉9h组.随后用ELISA方法检测人RPE细胞不同实验组上清中IL-8分泌量的变化.细胞免疫荧光和Western blot方法观察PI3K、PPI3K、T-AKT、P-AKT的表达.结果:随着牵拉时间的延长,ELISA方法检测人RPE细胞不同实验组上清中IL-8分泌量逐渐增加[924.79± 5.92 pg/mL、947.73± 5.34 pg/mL、974.53± 5.74 pg/mL、979.57± 1.12 pg/mL、1019.22± 4.25 pg/mL],差异有统计学意义(F=166,p＜0.01),各牵拉组与对照组分别对比,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞中P-AKT蛋白表达增加[0.61±0.02、0.97±0.05、0.99± 0.04、1.21±0.11、1.20± 0.07],差异有统计学意义(F=41.24,p＜0.01),各牵拉组与对照组分别对比,差异有统计学意义(P＜0.05),AKT表达未见明显变化.结论:机械应力牵拉人RPE细胞时,细胞上清中IL-8分泌量逐渐增加同时RPE细胞内PI3K/AKT通路明显激活,并与牵拉时间有关,为探究EMT原因和对防治PVR提供了理论基础.