甲状旁腺激素对成骨细胞中C1C-3氯通道表达及成骨分化影响的研究

目的:观察甲状旁腺激素(PTH)对成骨细胞中C1C-3氯通道表达及成骨分化影响,初步探索C1C-3介导PTH在细胞成骨分化中的作用.方法:采用10-M、10-9M、10-10MPTH持续刺激和间断刺激MC3T3-E1细胞72h后,通过CCK-8试剂盒法检测MC3T3-E1细胞的增殖情况,Real-Time PCR法检测MC3T3-E1细胞中Clcn3及成骨相关基因Alp、Runx2的表达情况,免疫荧光法检测10-9M PTH不同给药方式下对C1C-3蛋白表达的影响.结果:经不同浓度PTH连续和间断处理72h后,结果显示10-9MPTH间断刺激的MC3T3-E1细胞的增殖能力最强,且其Alp、Runx2 mRNA表达均高于10-8M组和10-10M组(P＜0.05),而相同浓度间断刺激的MC3T3-E1细胞成骨相关基因的表达均高于持续刺激组,以10-9M间断刺激组差异最显著(P＜0.05),而10-8M和10-10M均无统计学差异(P＞0.05),10-9MPTH刺激的MC3T3-E1细胞中C1C-3蛋白表达也显著增加(P＜0.05).结论:成骨细胞的C1C-3氯通道能够响应PTH的刺激发生变化,并伴随着成骨相关基因Alp、Runx2表达的增强.