大肠埃希菌外排泵AcrAB-TolC调控基因的表达与季铵盐化合物抗性关系的研究

目的 研究大肠埃希菌外排泵AcrAB-TolC的调控基因marR、marA、soxS、rob在季铵盐化合物(quaternary ammonium compounds,QACs)耐药中的作用. 方法 取6株大肠埃希菌临床分离株,应用苯扎溴铵进行诱导,采用琼脂稀释法检测菌株在加入外排泵抑制剂氰化羰基-3-氯苯腙(Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,CCCP)前后对苯扎溴铵的敏感性;PCR扩增外排泵调控基因marR、marA、soxS、rob并测序;采用实时荧光定量PCR检测marR、marA、soxS、rob基因的转录水平. 结果 5株诱导株的苯扎溴铵最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)较其亲代增高4～8倍;加入外排泵抑制剂后11株菌的苯扎溴铵MIC值较加入前下降50.00％～99.61％,且诱导后的菌株下降率显著高于诱导前(Z=-2.943,P=0.003),5株诱导株的MIC值较其亲代下降50.00％以上;4株诱导株marA基因的转录水平较其亲代增高17～33倍,5株诱导株marR基因的转录水平较其亲代增高1～10倍(P＜0.05);12株菌中有10株菌外排泵调控基因marR存在142位Tyr的缺失,11株菌marA基因存在145位Ser缺失和Met1Val突变,10株菌soxS基因存在Ser12Ala突变. 结论 marA基因转录增加致外排泵AcrAB-TolC的高表达与季铵盐化合物对大肠埃希菌的抗性产生可能有一定关联.