应用液相芯片技术检测六种输入性烈性传染病病原的方法研究

目的 研究新型中药制剂对疟原虫的杀伤及对宿主的免疫影响.方法 应用将多重PCR扩增和液相芯片检测技术检测埃博拉病毒(EBV)、拉沙热病毒(LFV)、裂谷热病毒(RVFV)、马尔堡病毒(MRBV)、克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)、中东呼吸综合征病毒(MERSV),为相关输人性烈性传染病的检测提供一种技术储备.方法 建立6种相关病毒的多重PCR扩增反应体系,分别用每种病毒特异性核酸探针与不同编码的荧光微球进行偶联,将PCR扩增产物与偶联有不同核酸探针的微球混合物进行杂交反应,建立6种病毒的液相芯片检测方法,并进行特异性和灵敏度验证.结果 特异性检测结果表明不同病毒之间检测结果没有出现相互交叉干扰的现象,说明建立的6种烈性传染病病毒液相芯片检测方法用于不同病毒的检测具有良好的特异性;EBV检测核酸灵敏度为10-7 ng,LFV、MRBV、RVFV、CCHFV、MERSV检测灵敏度均为10-6 ng.结论 建立的可同时检测EVB等6种输入性烈性传染病病毒的方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于相关输入性传染病疫情的应急检测.