Xpert MTB/RIF检测痰标本中结核分枝杆菌的方法学研究

目的 探讨Xpert MTB/RIF检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)的最佳实验条件并进行方法学评价. 方法 应用Xpert MTB/RIF检测MBT标准株H37Rv、H37Ra和牛分枝杆菌及20种常见非结核分枝杆菌(NTM)、18种非分枝杆菌病原体和临床分离株,分析Xpert MTB/RIF的敏感性、特异性和重复性,比较不同前处理方法对实验结果的影响,针对仪器出现的报警、错误及无效结果进行相应的处置和总结. 结果 MTB标准菌株H37Rv、H37Ra和牛分枝杆菌Xpert MTB/RIF检测阳性,敏感度为1×102 CFU/ml(在痰标本中的检测极限为106 CFU/ml);20种常见NTM和18种非分枝杆菌病原体检测阴性;标本中含有1％浓度的红细胞、白细胞、血清未对103/ml的H37Rv产生干扰作用;重复试验表明本法批间、批内变异系数均小于15％.100株MTB(其中50株Hain线性探针试验确认存在rpoB基因突变)和20株NTM临床分离株加入阴性临床痰标本制备成为含菌浓度为2×102条/ml的模拟痰标本经Xpert MTB/RIF检测均相符.在SR处理液加入半胱氨酸的改良直接法前处理痰液Xpert MTB/RIF检测出现“错误+无效”的比例显著低于沉淀处理法和直接法前处理的痰标本(x2值分别为4.19和6.74,P＜0.01). 结论 Xpert MTB/RIF灵敏、特异、快速、简便,可用于MTB和利福平耐药MTB的快速检测,但仍存在错误和无效检测而影响实验结果,应采取有效措施予以避免.