莱姆关节炎昆明小鼠动物模型的建立

目的 使用伯氏疏螺旋体菌悬液对昆明小鼠进行胫跗关节皮下注射,建立昆明小鼠莱姆关节炎动物模型.方法 将40只昆明小鼠随机分为PBS组、BSK组、实验组Ⅰ和实验组Ⅱ,每组10只,分别经双后肢胫跗关节皮下注射相应菌悬液或对照液,每周观察小鼠健康变化,测量小鼠双后肢胫跗关节左右径,并进行足及胫跗关节X光检查,记录相关数据.饲养6周后,将小鼠脱颈处死,取双后肢胫跗关节进行组织病理学检查及IL-1p和TNF-a相关检测,对两种方法建立的昆明小鼠莱姆关节炎模型进行评价.培养基中培养,每种抗生素分别设立20 ug/ml(高浓度),2 ug/ml(中浓度)和0.2 ug/ml(低浓度)三种浓度.提取细菌总RNA,采用Real-time PCR分析MRSA ccrA、ccrB、ccrC基因的表达水平. 结果 PBS组及BSK组小鼠在实验期间未出现关节红肿现象,小鼠活动自如.实验组Ⅰ和实验组Ⅱ注射1周后小鼠胫跗关节出现肿胀,肿胀持续1周后逐渐减轻,但实验组Ⅱ小鼠减轻程度低于实验组Ⅰ小鼠.实验组Ⅰ和实验组Ⅱ小鼠注射后6周时胫跗关节组织研磨液中TNF-a和IL-1β水平升高,分别为(44.07±12.07)pg/ml、(18.59±4.514)pg/ml和(47.17±8.387)pg/ml、(20.37±5.381)pg/ml.病理学检查实验组Ⅰ和实验组Ⅱ小鼠关节间隙变窄,关节滑膜纤维组织增生,细胞层数增多,大量炎性细胞浸润,滑膜组织增厚.影像学检查实验组Ⅰ和实验组Ⅱ小鼠胫跗关节周围软组织肿胀,关节间隙毛糙变窄,呈高密度影,骨质破坏严重. 结论 1×105/ml PBS伯氏疏螺旋体悬液和1×105/mlBSK伯氏疏螺旋体悬液均能诱导昆明小鼠莱姆关节炎的发生,以1×105/ml BSK伯氏疏螺旋体悬液诱发的关节炎更严重,更持久.