新生儿科产NDM-1耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌主动外排泵基因acrA的研究

目的 研究主动外排泵基因arcA在耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌中抗生素转录水平,探讨主动外排机制在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中的作用. 方法 收集2012年8月-2013年12月中南大学湘雅二医院新生儿科患者的痰及血液标本分离的7株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌株作为实验组,10株同一新生儿科碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌株作为对照组,采用Phoenix100全自动微生物分析系统进行鉴定及药敏检测,采用KB法和Etest进行表型确认,采用改良Hodge确证试验确定细菌耐药表型,采用RAPD技术检测细菌基因型,采用PCR扩增NDM-1 、acrA基因,采用RT PCR检测acrA mRNA表达. 结果 7株试验菌均产碳青霉烯酶.PCR扩增显示其染色体和质粒上均携带NDM-1基因;RAPD显示 7株试验菌为同一 ST17型;5株试验菌和8株敏感菌株检出外排泵基因acrA;RT-PCR显示试验组和对照组acrA mRNA表达水 平均值分别为0.545和1.899,两组arcA mRNA扩增产物电泳条带与16S rRNA扩增产物电泳条带的灰度比值分别为0.13和0.317,结果进行Fisher精确概率检验,P=0.317＞0.05,差异无统计学意义. 结论 acrA的表达可能不是产NDM 1耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药的必要原 因.