转瓶培养与生物反应器微载体培养重组腺病毒的比较

目的 分别用3L转瓶和7L生物反应器微载体系统培养人胚胎肾细胞(HEK-293细胞)并接种H3型流感重组腺病毒,比较两种方法培养细胞及重组腺病毒的效果. 方法 分别用3L转瓶和7L生物反应器培养HEK-293细胞.转瓶每24 h取样,生物反应器每12 h取样,记录细胞总数.待细胞长满表面85％～90％时接种流感重组腺病毒,完全病变后收取病毒液并测定病毒滴度. 结果 转瓶培养HEK-293细胞3d,细胞增殖增加1.85～2.45倍,为(3.71～4.90)×107个[(2.95～3.90)×104 cells/ cm2],生物反应器培养3d,细胞增长4.72～5.00倍,为(132.15～140.09)×107个[(24.88～28.72)×104 cells/cm2].转瓶培养重组腺病毒滴度为6.85 TCID50/ml,生物反应器微载体系统培养腺病毒滴度为7.200 TCID50/ml. 结论 生物反应器微载体系统培养流感重组腺病毒数量和滴度均高于转瓶培养,不但提高了疫苗的产量,还减少了细胞分泌物的残留,增强了疫苗接种的安全性.