丙型肝炎病毒多表位基因载体的构建与表达

目的 构建编码多个丙型肝炎病毒(HCV)抗原表位的真核表达载体,建立稳定转染的细胞株,并利用小鼠移植瘤模型初步评估疫苗在动物体内的免疫反应状况.方法 合成含10条CTL细胞表位的M2基因,与含多条B细胞及T细胞表位的M1基因连接合成M1M2基因;将M2、M1M2基因分别与pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)/M2及pcDNA3.1(+)/M1 M2;将上述两种载体与pcDNA3.1(+)/M1分别转入SP2/0细胞中,并检测目的蛋白表达;用3种重组质粒分别免疫BALB/c小鼠移植瘤模型,初步评估疫苗引起的免疫反应.结果 3种真核表达载体在SP2/0细胞中均能得到稳定表达,免疫荷瘤小鼠后,小鼠瘤体的大小M1M2组＜M2组＜M1组＜空质粒对照组,实验组均能观察到肿瘤组织的坏死现象.结论 成功构建了HCV多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/M1 M2,用该表达载体免疫小鼠可引起较强的特异性免疫应答.