肠道病毒71型灭活疫苗TritonX-100残留检测方法的建立与验证

目的 建立适合于肠道病毒71型(Vero细胞)灭活疫苗原液TritonX-100残留检测方法并加以验证.方法 使用分光光度法对TritonX-100残留进行检测,并按照《中华人民共和国药典》(2010年版)二部中的相关规定对检测方法进行验证及初步应用.结果 本方法在5～50 μg/ml浓度范围能定量检测Tri-tonX-100残留量,取不同浓度TritonX-100检测其回收率在85.97％～107.31％,RSD≤4.05％;重复性检测的RSD≤0.25％,中间精密度试验RSD≤3.18％;对检测中影响结果的参数:检测持续时间、检测温度、检测波长和检测试剂苯酚浓度在一定范围内适度变化后,检测理论浓度的TritonX-100,其平均回收率在86.42％～107.80％,RSD≤3.54％;340 nm波长扫描PBS、5％苯酚、PBS+苯酚的A值均＜0.01,TritonX-100及5％苯酚反应物的A值明显高于此值.结论 本方法的准确度、精密度、专属性以及耐用性均符合规定,方法准确稳定,可用于对肠道病毒71型(Vero细胞)灭活疫苗原液中TritonX-100残留量的检测.