流体剪切应力对人脐静脉内皮细胞Pim-1基因表达的影响

目的 探讨流体剪切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中Pim-1基因表达的影响及可能的信号机制.方法 酶消化法分离健康产妇新鲜脐静脉获取原代HUVECs,应用平行平板流动腔系统给HUVECs加载不同时间(1、4、6h)和不同大小(0.5、1.5、3.0 Pa)的层流剪切应力,用实时定量RT-PCR检测Pim-1基因的表达水平,用蛋白质印迹法检测p-Akt和p-STAT3的表达水平,利用Wortmannin (PI3K抑制剂)、Deguelin (Akt抑制剂)和AG490 (JAK抑制剂)信号阻断剂探讨信号转导途径.结果 HUVECs在1.5 Pa剪切应力作用4h后Pim-1基因表达明显增加.不同强度的切应力均会刺激Pim-1基因的表达,其中3.0 Pa表达最强.切应力能显著激活p-Akt和p-STAT3的表达.AG490可以明显抑制Pim-1的表达,而Wortmannin和Deguelin增强Pim-1的表达.结论 流体剪切应力可诱导HUVECs中Pim-1基因表达,其表达量与刺激时间和剪切应力的强度密切相关,这种作用可能通过JAK/STAT3和PI3K/Akt信号通路调节.