CD36/Src/ERK通路参与单核细胞向巨噬细胞的分化

目的:探讨脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)在单核细胞向巨噬细胞分化中的作用.方法:采用不同浓度(0、100和200μg/L)佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导人源单核细胞THP-1向巨噬细胞分化;用CD36小片段干扰RNA(CD36 small interfering RNA,siCD36)干扰THP-1细胞CD36的表达;又用CD36 cDNA的重组慢病毒转染THP-1细胞,构建CD36过表达细胞系.显微镜下观察细胞形态;结晶紫染色法检测细胞黏附能力;流式细胞术和Western blot检测细胞分化过程中CD36的蛋白表达,real-time PCR检测CD36、CD11b和CD80的mRNA水平.Western blot检测THP-1细胞向巨噬细胞分化过程中细胞外信号调节激酶(extracellular sig?nal-regulated kinase,ERK)和Src酪氨酸激酶的表达.结果:THP-1细胞向巨噬细胞分化的过程中,CD36表达增加(P<0.01).与正常细胞相比,siCD36干扰细胞的表面积减小,黏附能力降低(P<0.01),细胞中CD11b和CD80的mRNA水平下降(P<0.01);而CD36过表达细胞的表面积明显增大,黏附能力增强(P<0.05),且细胞中CD11b和CD80的mRNA水平升高(P<0.01).THP-1细胞向巨噬细胞分化过程中,ERK的磷酸化明显增加,而siCD36干扰的THP-1细胞分化过程中ERK的磷酸化和Src的磷酸化则明显减少(P<0.05).结论:CD36通过增强Src磷酸化从而促进ERK的磷酸化及活化,最终促进THP-1细胞向巨噬细胞分化.