IL-1β通过抑制AKT下调人脐静脉内皮细胞eNOS Ser1177磷酸化水平

目的:探讨白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)能否调控人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)第1177位丝氨酸(Ser1177)磷酸化水平及其可能的机制.方法:将HUVECs随机分为正常对照组、肿瘤坏死因子α(tumor necro?sis factor-α,TNF-α)处理组、IL-1β处理组、IL-6处理组、单纯SC79[蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)特异性激动剂]处理组和SC79+IL-1β处理组.用Western blot方法检测HUVECs中eNOS、p-eNOS-Ser1177、AKT和p-AKT-Ser473的蛋白水平.采用化学比色法检测HUVECs培养液中一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量.结果:与正常对照组相比,TNF-α和IL-6处理对HUVECs中p-eNOS-Ser1177的蛋白水平均无显著影响(P>0.05),而IL-1β处理则显著降低细胞中p-eNOS-Ser1177蛋白水平和培养液中NO含量(P<0.05),同时伴有p-AKT-Ser473的下调(P<0.05).IL-1β对细胞中p-eNOS-Ser1177蛋白水平和培养液中NO含量的调节能被SC79所阻断(P<0.05).结论:IL-1β可下调HUVECs中p-eNOS-Ser1177蛋白水平进而影响eNOS活性,这种效应可能涉及到AKT/eNOS通路.