过表达Homer1a对神经元机械性损伤模型的保护作用及可能机制
Chinese Journal of Pathophysiology(2019)
Abstract
目的:探讨过表达Homer1a对神经元机械性损伤模型细胞凋亡和AMP活化蛋白激酶(AMPK)表达的影响.方法:分离培养大鼠大脑皮层神经元,随机分组为对照组、模型组、空载组和Homer1a过表达(Exp-Homer1a)组.构建神经元机械性损伤模型,转染Homer1a过表达载体.采用MTT法检测各组细胞活力,qPCR检测各组细胞Homer1a的mRNA表达水平,使用乳酸脱氢酶(LDH)测试盒测定各组细胞上清液LDH活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,Western blot检测各组Hormer1a、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p-AMPKα 和AMPKα 蛋白的表达.结果:与对照组比较,机械性损伤神经元的活力显著降低,上清液LDH活性和神经元凋亡率显著增加(P<0.05),且Homer1a mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,Exp-Homer1a组的上清液LDH活性和神经元凋亡率显著降低,神经元中cleaved caspase-3和Bax的表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2和p-AMPKα 的表达水平显著升高(P<0.05).结论:过表达Homer1a可能通过促进激活AMPKα 磷酸化及抑制神经元凋亡来提高机械性损伤神经元的存活率.
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