质子感知受体OGR1介导酸化环境对内皮祖细胞活力和成管作用的影响

目的:分析卵巢癌G蛋白偶联受体1(ovarian cancer G-protein-coupled receptor 1,OGR1)在内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)中的表达,探索OGR1的酸调节效应对内皮祖细胞活力和成管能力的影响.方法:体外分离和培养小鼠骨髓源性内皮祖细胞,采取FITC-UEA-I和DiI-Ac-LDL双荧光染色法鉴定,利用real-time PCR和Western blot检测OGR1在小鼠EPCs的表达.采用不同pH值培养基处理EPCs后分析OGR1表达.以小干扰RNA(siRNA)沉默OGR1,使用CCK-8实验和流式细胞术分析EPCs的活力及周期分布的变化,划痕实验、Transwell迁移实验以及成管实验分析EPCs的迁移能力和成管作用的变化.结果:分离诱导的EPCs分化良好,FITC-UEA-I及DiI-Ac-LDL染色均呈阳性,小鼠内皮祖细胞存在OGR1的mRNA及蛋白表达.随着培养基pH值降低,OGR1表达逐渐升高,在pH 6.4的培养基中OGR1表达最高(P<0.05).pH 6.4培养基抑制EPCs的活力并导致其生长停滞,而使用siRNA沉默OGR1后可部分逆转酸化环境对EPCs的作用(P<0.05).pH 6.4培养基抑制EPCs的迁移和成管能力,而使用siRNA沉默OGR1后可部分逆转酸化环境对EPCs的作用(P<0.05).结论:OGR1在EPCs中呈阳性表达,并介导了酸化环境对EPCs活力及迁移和成管能力的抑制作用.