血管紧张素Ⅱ诱导高血压大鼠肠系膜动脉PP2A激活的机制研究

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压大鼠肠系膜动脉中蛋白磷酸酶2A (PP2A)被激活的可能机制.方法:选用雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠,采用皮下埋置微量渗透泵持续灌注AngⅡ(500 ng·kg-1 ·min-1,14 d)的方法复制高血压模型.40只大鼠被随机分为4组,即对照(control)组(n=10)、AngⅡ组(n=10)、坎地沙坦(CAN;AngⅡ1型受体阻滞剂)+AngⅡ组(n=10)和CAN组(n=10).CAN+ AngⅡ组和CAN组均于埋置微量渗透泵后第1天开始予以坎地沙坦酯(10mg·kg-1 ·d-1)灌胃.术后第15天处死大鼠,留取血清和肠系膜动脉.用无创大鼠血压测量仪检测大鼠尾动脉收缩压,采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清AngⅡ含量,采用Western blot方法检测肠系膜动脉中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达、eNOSSer1177磷酸化水平、PP2A催化亚基(PP2Ac)蛋白表达、PP2Ac Tyr307磷酸化水平及PP2A内源性抑制蛋白IPP2A2表达水平,采用PP2A活性检测试剂盒测定肠系膜动脉PP2A活性变化.结果:(1)与control组相比,AngⅡ组大鼠收缩压显著升高(P＜0.05);与AngⅡ组相比,CAN+ AngⅡ组和CAN组收缩压显著降低(P＜0.05).(2)与con-trol组相比,AngⅡ组和CAN+ AngⅡ组大鼠血清AngⅡ含量显著升高(P＜0.05).(3)与control组相比,AngⅡ组肠系膜动脉eNOS Ser1177磷酸化水平显著降低(P＜0.05),PP2A活性显著增高(P＜0.05),且二者变化呈负相关(r=-0.842,P＜0.05);与AngⅡ组相比,CAN+ AngⅡ组eNOS Ser1177磷酸化水平显著上调(P＜0.05),PP2A活性显著降低(P＜0.05).(4)与control组相比,AngⅡ组PP2Ac Tyr307磷酸化水平和IPP2A蛋白表达均显著降低(P＜0.05);与AngⅡ组相比,CAN+ AngⅡ组PP2Ac Tyr307磷酸化水平和IPP2AA蛋白表达显著增高(P＜0.05).(5) CAN组各项指标差异无统计学意义,各组间eNOS及PP2Ac蛋白表达差异亦均无统计学意义.结论:在AngⅡ诱导的高血压大鼠肠系膜动脉中,AngⅡ通过其1型受体介导,降低PP2Ac Tyr307磷酸化水平和IPP2A2蛋白表达,激活PP2A,进而引起eNOS S1177磷酸化水平下调,最终导致血管内皮功能障碍的发生.